Clasificación según el procedimiento de separación
El principio básico de la separación de las sustancias que componen una mezcla se fundamenta en una serie de sucesivos equilibrios entre la fase estacionaria y la fase móvil. El equilibrio dependerá de la partición o diferente adsorción que tengan la fase estacionaria y los componentes de la mezcla.
La diferencia dependerá de las propiedades físicas y químicas de los componentes. El mayor o menor avance en el sistema cromatográfico dependerá de la afinidad del componente y la fase estacionaria. El componente con menor afinidad por la fase estacionaria en presencia de una fase móvil llamada eluyente será eluido en primer lugar, y por tanto se desplazará con mayor velocidad por el sistema cromatográfico.
Tabla de clasificación de métodos cromatográficos
F. estacionaria |
F. móvil |
Soporte |
Cromatografía |
Siglas |
|---|---|---|---|---|
| sólido (adsorción) |
gas líquido |
columna columna capa fina |
sólido-gas líquida en papel y/o capa fina |
G.S.C
/ G.C C.L / H.P.L.C T.L.C |
| líquido (partición) |
gas liquido |
columna columna |
líquido-líquido gas-líquido |
C.G.L C.L.L / H.P.L.C |
| resina (intercambio iónico) |
líquido | columna | intercambio iónico | |
| gel (filtración en ) |
líquido | columna | filtración de gel |
*H.P.L.C : cromatografía líquida de alta presión.
Clasificación según el proceso de desarrollo
Según el procedimiento en que se desarrolla se utiliza la siguiente clasificación, que fue la usada por Tiselius en 1940:
- Desarrollo por elución.
- Desarrollo por desplazamiento.
- Análisis frontal.
Desarrollo por elución
Representa el concepto básico de la separación cromatográfica y es la técnica más usada en los distintos métodos cromatográficos (gaseosa, líquido-gas, líquido-líquido, sólido-líquido). Para describir esta técnica considérese una mezcla de sólo dos componentes. Dicha mezcla se introduce en el extremo superior de una columna adsorbente y sus componentes se separan en zonas, al pasar uno o más eluyentes a través de la columna, debido a las distintas afinidades entre los componentes y ambas fases.
La fase móvil es adsorbida débilmente por la fase sólida estacionaria. Este ideal teórico de desarrollo por elución no siempre se consigue en la práctica. Es un método analítico esencial.
Desarrollo por desplazamiento
Consiste en desarrollar con un disolvente que sea adsorbido por la fase estacionaria con mayor fuerza con que adsorbe a los componentes de la mezcla, al contrario que el desarrollo por elución. A medida que el disolvente pasa a lo largo de la columna, desplaza a la mezcla, que al mismo tiempo se separa parcialmente.
Parte del material menos fuertemente adsorbido se recupera de forma pura, seguido por una mezcla (interfase) y seguido posteriormente del otro componente en forma pura. Es un método preparativo útil.
Análisis frontal
Consiste en la aplicación continua de una mezcla en el origen. En principio el componente menos fuertemente adsorbido fluye a lo largo de la columna, mientras que el más fuertemente adsorbido se acumula cerca del origen. Sin embargo existe un límite en la capacidad del adsorbente y, cuando este límite se alcanza, también el componente más fuertemente adsorbido empieza a desplazarse a lo largo de la columna. Por esto, las primeras fracciones contendrán el material menos fuertemente adsorbido; más tarde aparecerá una mezcla de ambos componentes. Es una técnica preparativa más que analítica.